如图是含某目的基因的DNA片段，据图回答下列问题：

(1)根据图示可知，若用EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶切割，因此DNA片段可有__________个限制酶切割位点，切割后共有________种________个切割末端。

(2)EcoRⅠ限制酶切割后形成的末端是________末端，在图中用笔标出切割部位。

(3)如果EcoRⅠ限制酶切割形成的目的基因片段要导入受体细胞，一般需要________作载体。其应具备的特点有：________________、____________、____________。

(4)E·coliDNA连接酶连接目的基因和载体时连接的是图中________(填字母)部位的化学键。

资料显示，近10年来，PCR技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段，其原理是利用DNA的半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答：

(1)加热至94℃的目的是使DNA中的________键断裂，这一过程在细胞内是通过________的作用来完成的。

(2)当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个DNA分子，此过程中原料是____________，遵循的原则是________________________________________________________________________。

(3)请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处：

①________________________________________________________________________；

②________________________________________________________________________；

③________________________________________________________________________。

(4)Taq酶的特点是                                                                                                  (　　)

A．耐强酸            B．耐强碱            C．耐高温            D．最适温度37℃

目前，科学家已在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和α－抗胰蛋白酶等重要医药产品。结合我国第一头转基因牛“滔滔”的培育程序(如图所示)，回答下列问题：

(1)哺乳动物的c过程通常采用________，将药用蛋白与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起导入受精卵中。从遗传学原理看转基因牛“滔滔”与亲本A、B的最根本的区别是含有____________。

(2)获取目的基因首先用到的是基因手术刀——限制酶，限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特殊部位的_______________________________

断开，暴露出________；DNA连接酶和DNA聚合酶都是通过形成磷酸二酯键而连接DNA的缺口，不同之处是：①DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段3′端的羟基上，形成磷酸二酯键，DNA连接酶是连接两个DNA片段，形成磷酸二酯键。

②________________________________________________________________________。

害虫损伤番茄的叶片后，组成叶片细胞的细胞壁能释放出一种类激素物质，这种物质可以扩散到番茄的其他部位，诱导细胞内蛋白酶抑制剂基因的表达，合成蛋白酶抑制剂，导致害虫不能消化食物而死亡。

科学家利用转基因技术把番茄的蛋白酶抑制剂基因转移到玉米，使玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，有效抵御了玉米螟对玉米的危害。请结合上面的材料回答：

(1)转移到玉米的番茄抑制剂基因最可能与玉米的______结合在一起，成为玉米________的一部分。

(2)转移了番茄蛋白酶抑制剂基因的玉米合成番茄蛋白酶抑制剂的具体部位是__________，合成的化合物可能还需要在________________加工才具有生物活性。

(3)这种抗玉米螟玉米品种的培育技术属于________技术，这种变异在生物学上称为________________。

(4)在种植了这种转基因玉米的农田中杂草是否也会出现抗玉米螟性状？________，原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

(1)过程②中必须用______________对Ti质粒和绿色荧光蛋白基因进行切割。

(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是____________。

(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的____________。获得的转基因克隆猪可以解决的医学难题是可以避免__________________。

(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是____________(用数字表示)。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)

④表达出蓝色荧光蛋白