如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄-马铃薯”植株的过程,请回答下列问题.
(1)①②过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解,其中“酶解”所用的酶应该包括 .
(2)过程③一般常用的化学试剂是 ,目的是 .
(3)⑤、⑥过程的名称分别是 、 .
(4)一般在培养基上培养24~48小时后,大部分原生质体已再生出细胞壁.可以取样,通过 实验来鉴别细胞壁是否已经再生.
(5)过程⑤⑥⑦的细胞工程技术是 .
(6)请说明运用此植物体细胞杂交法的最大好处: .
解:(1)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,根据酶的专一性原理,去除植物细胞壁时可使用纤维素酶和果胶酶.
(2)③是诱导原生质体融合的过程,该过程可采用化学方法(聚乙二醇),也可采用电激、离心、振动等物理方法.
(3)图中⑤为脱分化过程,⑥为再分化过程.
(4)可通过植物细胞质壁分离与复原实验来鉴定细胞壁是否已经再生.
(5)形成杂种细胞后还需要采用植物组织培养技术将其培育成杂种植株,因此图中过程⑤⑥⑦为植物组织培养过程,其原理是植物细胞具有全能性.
(6)植物体细胞杂交的研究克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍,为作物育种提供了新的思路.
故答案为:
(1)纤维素酶和果胶酶
(2)聚乙二醇(PEG) 诱导原生质体融合
(3)脱分化 再分化
(4)植物细胞质壁分离与复原
(5)植物组织培养
(6)克服不同生物远源杂交不亲和的障碍
毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.
(1)理论上基因组文库含有某种生物的 基因,若要从供体羊中获得目的基因,应先建立该供体羊的基因组文库,再从中 出所需的基因.
(2)将重组表达载体导入成纤维细胞的方法是 ,为了获得母羊,移植前需对已经成功导入目的基因的胚胎进行 ,也可取 (雄或雌)羊皮肤细胞组织块的成纤维细胞做目的基因的受体.
(3)从卵巢中吸取的卵母细胞,一般要培养到 阶段才能用于实验,实验中要用微型吸管吸出第一极体与卵母细胞的 .
(4)当胚胎发育到 阶段时,将胚胎移入受体(代孕)动物体内.
解:(1)基因组文库含有某种生物的全部基因,若要从供体羊中获得目的基因,应先建立该供体羊的基因组文库,再从中筛选出所需的基因.
(2)将重组表达载体导入动物细胞的方法是显微注射法,为了获得母羊,移植前需对已经成功导入目的基因的胚胎进行性别鉴定,也可取雌羊细胞组织块的细胞做目的基因的受体.
(3)从卵巢中吸取的卵母细胞,一般要培养到减数第二次分裂中期才能用于实验,实验中要用微型吸管吸出第一极体与卵母细胞的细胞核.
(4)胚胎移植最好选择发育良好的囊胚或桑椹胚,此时胎盘还没有形成,便于冲卵和胚胎移植.
故答案为:
(1)全部 筛选
(2)显微注射法 性别鉴定 雌羊
(3)减数第二次分裂中期 细胞核
(4)囊胚或桑椹胚
胰岛素是治疗糖尿病的重要药物,如图是基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图,请据图回答:
(1)完成过程②、③必需的酶分别是 、 .
(2)在利用A、B获得C的过程中,必须用 切割A和B,使它们产生相同的 ,再加入 ,才可形成C.
(3)取自大肠杆菌的物质B,在基因工程中起 作用,必须具备的条件是 (至少两个).
解:(1)②为逆转录过程,需要逆转录酶的参与;③为解旋过程,需要解旋酶.
(2)构建基因表达载体的过程中,必须用相同的限制酶切割A(含目的基因的外源DNA分子)和B(运载体)以产生相同的黏性末端,再加入DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成C(重组DNA分子).
(3)取自大肠杆菌的物质B为质粒,其在基因工程中起载体作用,必须具备的条件是具有标记基因和一至多个限制酶切割位点、能够在宿主细胞中复制并稳定保存等.
故答案为:
(1)逆转录酶 解旋酶
(2)同一种限制酶 黏性末端 DNA连接酶
(3)载体 具有标记基因和一至多个限制酶切割位点、能够在宿主细胞中复制并稳定保存(至少写出两个)
图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图.据图回答:
(1)随着科技发展,获取目的基因的方法也越来越多,如乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的,该方法称为 .此过程中所使用的酶是 .除酶外还需要加入引物,其原因是
(2)在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长.乙图为获得抗虫棉技术的流程.A过程需要的酶有 、 .图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是 .C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入 .
(3)离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株,此过程涉及的细胞工程技术是 ,该技术的原理是 .
(4)检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用 与提取出的 做分子杂交.
(5)科学家将植物细胞培养到 ,包上人工种皮,制成了神奇的人工种子,以便更好地大面积推广培养.
解:(1)甲图中获取目的基因时采用了PCR技术,该技术是在高温条件下进行的,需要用的是耐高温DNA聚合酶,除酶外还需要加入引物,其原因是DNA聚合酶不能从头合成,只能将单个脱氧核苷酸连接到DNA链上.
(2)图中A为基因表达载体的构建过程,该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒.图示将目的基因导入植物受体细胞的方法是农杆菌转化法.C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入卡那霉素,以淘汰不含重组质粒的细胞.
(3)将离体棉花叶片组织培育成转基因抗虫植株还需采用植物组织培养技术,该技术的原理是细胞具有全能性.
(4)检测目的基因是否转录出mRNA常采用分子杂交技术,即使用标记的目的基因(探针)与提取出的mRNA分子做分子杂交.
(5)人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,通过人工薄膜包装得到的种子.
故答案为:
(1)PCR技术 耐高温DNA聚合酶 DNA聚合酶不能从头合成,只能将单个脱氧核苷酸连接到DNA链上
(2)限制酶 DNA连接酶 农杆菌转化法 卡那霉素
(3)植物组织培养 植物细胞的全能性
(4)标记的目的基因 mRNA 分子
(5)胚状体
如图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程:图2表示体外受精培育优质奶牛的过程:图3表示番茄和马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程,请据图回答下列问题:
已知:
(1)图1中制备单克隆抗体的过程中,需要经过两次筛选,其中第二次筛选的目的是筛选出 .该过程所用到的生物技术有 .
(2)图2参与体外受精的精子需要经过成熟和 的过程,才能是卵细胞受精,若要获得多头于此优质奶牛相同的小牛,可对图2中囊胚中的 均等分割后进行胚胎移植,以上技术是在 (填“体外”或“体内”)完成的.
(3)图3中过程③常用的试剂是 .融合的原生质体形成杂种细胞的标志是 ,该过程与细胞中 (细胞器)的活动密切相关.
(4)过程⑤和⑥分别表示 和 .
解:(1)图1中制备单克隆抗体的过程中,需要经过两次筛选,其中第二次筛选的目的是筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞.该过程所用到的生物技术有动物细胞融合和动物细胞培养.
(2)图2参与体外受精的精子需要经过成熟和获能的过程,才能是卵细胞受精,若要获得多头于此优质奶牛相同的小牛,可对图2中囊胚中的内细胞团均等分割后进行胚胎移植,以上技术是在体外完成的.
(3)图3中过程③原生质体的融合常用的试剂是聚乙二醇(或PEG).再生出新的细胞壁是融合的原生质体形成杂种细胞的标志,高尔基体与植物细胞壁的形成有关,故该过程与细胞中高尔基体的活动密切相关.
(4)将杂种细胞培养成植株要经过脱分化和再分化等过程.过程⑤表示脱分化,过程⑥表示再分化.
故答案为:
(1)能产生特定抗体的杂交瘤细胞 动物细胞融合和动物细胞培养
(2)获能 内细胞团 体外
(3)聚乙二醇(或PEG) 再生出新的细胞壁(或形成新的细胞壁) 高尔基体(或高尔基体、线粒体)
(4)脱分化 再分化
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