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使用次数:108
更新时间:2009-12-17
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1.

6分)酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

   试管编号

项目

I

 

 

 

 

V

 

 

蒸馏水(mL

2

O

1

1

1

1

缓冲液(mL

0

2

1

0.5

0.5

0.5

果胶酶液(mL

O

0

O

0.5

O

0

蜗牛酶液(mL

O

0

O

O

0.5

0

纤维素酶液(mL

0

O

0

O

0

0.5

实验结果(绿色深浅程度)

+++

++++

++

 

(注:“+”越多表示绿色越深,表示颜色无显著变化)

1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是           ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。

2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有        等多种酶。该实验中        是空白对照组,其设置意义是               

3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用         洗涤。

4)原生质体是否符合要求还需进行检验,其检验的方法是                 

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题型:填空题
知识点:酶的应用
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【答案】

1)为了使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效果

2)果胶酶和纤维素酶      Ⅰ、、Ⅲ    排除无关变量的干扰  

3)等渗溶液

4)低渗涨破法

解析:本题考查有关酶的催化效率的实验,(1)实验过程中,需要轻摇试管,可以使细胞壁与酶充分接触,可以提高酶解效果(2)蜗牛以植物为食,所以唾液酶中含有果胶酶和纤维素酶,Ⅰ、没有添加酶溶液为空白对照组。其目的是排除无关变量的干扰。(3)离心后收集沉淀物,并用等渗溶液清洗,目的是保持细胞正常形态。(4)要用低渗涨破法来检验原生质体是否符合要求,若没有细胞壁则可以涨破,有则不能涨破。

=
考点梳理:
根据可圈可点权威老师分析,试题“ ”主要考查你对 酶的制备和活力的测定 等考点的理解。关于这些考点的“资料梳理”如下:
◎ 酶的制备和活力的测定的定义
酶的制备和活力的测定:

酶活力(enzymeactivity):也称为酶活性,是指酶在催化一定的化学反应时表现出来的能力,通常用酶促反应的速率即酶促反应过程中单位时间内底物的减少量或产物的生成量来表示。酶活力的高低会受温度、pH、激活剂等多种因素的影响。酶的提取一般选择在低温和适合的pH下进行,有时还要加入酶的激活剂以提高酶活力。例如,从植物材料中提取果胶酶就是在低温、偏酸性的提取液和NaCl作激活剂的条件下进行的。
一、制备果胶酶
1、实验材料和器具:新鲜的水果或蔬菜;质量分数为10%的NaCl溶液,0.1mol/L冰醋酸;研钵,剪刀,漏斗,纱布或滤纸,烧杯,精密pH试纸,试管,酒精灯,离心机,榨汁机等。
2、果胶酶的制备:
(1)将50g新鲜的水果或蔬菜洗净,在预冷的研钵内用剪刀迅速剪碎后研磨,边研磨边加入质量分数为10%NaCl溶液50mL,制成匀浆。
(2)漏斗中放置滤纸或5层纱布过滤匀浆液,收集滤液。
(3)以4000r/min的离心速率离心滤液15min。注意使用同一规格的离心管,离心管内滤液的高度不超过离心管长度的2/3,离心前要确保在离心机中对称放置的离心管(内含滤液)的质量相等。(4)离心完毕后,果胶酶主要存在于离心管的上清液中,迅速地将上清液倒入洁净的小烧杯内,用0.1mol/L冰醋酸将pH调至3~4,在0~4℃下保存备用。
二、观察果胶酶对苹果匀浆液的作用
1、用榨汁机制作苹果匀浆液,将匀浆液置于90℃的恒温水浴中保温4min。冷却后再过滤,收集滤液。
2、取两支试管,编号为1和2,分别加入30mL滤液,再向试管1中加入30mL保存备用的上清液,向试管2中加入经过90℃水浴保温4min后的上清液30mL,振荡摇匀两支试管,置于室温下。
3、观察两支试管中苹果匀浆液的澄清程度变化,并将结果记录在下表中。

项目

苹果匀浆液/mL

上清液/mL

90℃水浴保温4min后的上清液/mL

现象

澄清时间

试管1 (样品管)

30

30

试管2 (对照管)

30

30

◎ 酶的制备和活力的测定的知识扩展
酶活力(enzymeactivity):也称为酶活性,是指酶在催化一定的化学反应时表现出来的能力,通常用酶促反应的速率即酶促反应过程中单位时间内底物的减少量或产物的生成量来表示。酶活力的高低会受温度、pH、激活剂等多种因素的影响。酶的提取一般选择在低温和适合的pH下进行,有时还要加入酶的激活剂以提高酶活力。例如,从植物材料中提取果胶酶就是在低温、偏酸性的提取液和NaCl作激活剂的条件下进行的。
一、制备果胶酶
1、实验材料和器具:新鲜的水果或蔬菜;质量分数为10%的NaCl溶液,0.1mol/L冰醋酸;研钵,剪刀,漏斗,纱布或滤纸,烧杯,精密pH试纸,试管,酒精灯,离心机,榨汁机等。
2、果胶酶的制备:
(1)将50g新鲜的水果或蔬菜洗净,在预冷的研钵内用剪刀迅速剪碎后研磨,边研磨边加入质量分数为10%NaCl溶液50mL,制成匀浆。
(2)漏斗中放置滤纸或5层纱布过滤匀浆液,收集滤液。
(3)以4000r/min的离心速率离心滤液15min。注意使用同一规格的离心管,离心管内滤液的高度不超过离心管长度的2/3,离心前要确保在离心机中对称放置的离心管(内含滤液)的质量相等。(4)离心完毕后,果胶酶主要存在于离心管的上清液中,迅速地将上清液倒入洁净的小烧杯内,用0.1mol/L冰醋酸将pH调至3~4,在0~4℃下保存备用。
二、观察果胶酶对苹果匀浆液的作用
1、用榨汁机制作苹果匀浆液,将匀浆液置于90℃的恒温水浴中保温4min。冷却后再过滤,收集滤液。
2、取两支试管,编号为1和2,分别加入30mL滤液,再向试管1中加入30mL保存备用的上清液,向试管2中加入经过90℃水浴保温4min后的上清液30mL,振荡摇匀两支试管,置于室温下。
3、观察两支试管中苹果匀浆液的澄清程度变化,并将结果记录在下表中。

项目

苹果匀浆液/mL

上清液/mL

90℃水浴保温4min后的上清液/mL

现象

澄清时间

试管1 (样品管)

30

30

试管2 (对照管)

30

30

三、注意事项
在温度、pH影响酶活性的实验中,始终都贯穿着对照原则,而在设置对照实验时最重要的是运用单一变量原则,其中的变量就是我们所研究的对象,所以在分析实验问题时,要紧紧抓住研究变量,把其他可能影响实验结果的变量变为常量,才能保证对照实验结果的严密性和准确性。对于温度对酶活性影响的关系曲线,在低于最适温度时,活性受温度影响比高于最适温度时的小。
◎ 酶的制备和活力的测定的知识点拨
知识点拨:

注意事项:
在温度、pH影响酶活性的实验中,始终都贯穿着对照原则,而在设置对照实验时最重要的是运用单一变量原则,其中的变量就是我们所研究的对象,所以在分析实验问题时,要紧紧抓住研究变量,把其他可能影响实验结果的变量变为常量,才能保证对照实验结果的严密性和准确性。对于温度对酶活性影响的关系曲线,在低于最适温度时,活性受温度影响比高于最适温度时的小。
◎ 酶的制备和活力的测定的教学目标
1、了解酶的制备方法。
2、了解酶的活力的测定 方法。
◎ 酶的制备和活力的测定的考试要求
能力要求:了解/识记
课时要求:1
考试频率:易考
分值比重:0.5

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