(1)PCR(聚合酶链式反应)技术在生物工程中相当重要。请简述.PCR扩增目的基因的基本过程。
(2)制备培养基方法:将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放入烧杯内,加200mL蒸馏水,用玻璃棒搅匀后,在酒精灯上加热。当蛋白胨、牛肉膏融化后,加入琼脂,用微火继续加热至琼脂溶化,补充水至200Ml。用0.1mol/L。的NaOH或0.1mol/L的HCl将pH调至7.0--7.2,分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌。当培养基的温度下降到50℃时,将其分装在5套培养皿中,在酒精灯附近倒平板,当培养基冷却至室温,按下表分别进行处理。将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养2~3天,观察每个培养基中的细菌生长情况。请回答下列问题:
第1套 | 开盖,在空气中暴露10s |
第2套 | 用手指接触培养基约10s |
第3套 | 用硬币接触培养基约10s |
第4套 | 用滤纸擦一下课桌,再接触培养基约10s |
第5套 | (不打开盖) |
①上述实验中有哪些是无菌操作 。
②第5套培养皿的作用是 。如果其培养基表面有菌落生长,说明了 。
③在1到4套的培养基中都出现了不同形态的菌落,原因是 。
能否说菌落的形态越多,用来接触的物体吸附的细菌数目就越多,为什么?
④实验中,有三处特别强调温度控制,请简要说明其控制温度的科学道理。
“高压蒸汽灭菌后培养基的温度下降到50~C'’才倒平板: 。
“当培养基冷却至室温,按下表分别进行处理”: 。
“将处理完毕的培养基置于35%的温度下培养”: 。
(1)目的基因DNA受热变性成为单链→引物与单链结合成互补序列→在DNA聚合酶作用下延伸)→重复循环完成扩增 [其他合理答案亦可]
(2)①高压蒸汽灭菌;在酒精灯附近倒平板)
②对照 培养基受到细菌污染 ③培养基中接入了不同种类的细菌 不能,菌落的形态越多,只能说明接触的物体中细菌的种类越多,菌落数越多才能说明细菌数多
④防止培养基的温度过高使培养皿因受热不均而破裂防止培养基温度过高杀死接种在其上的细菌(或微生物)让细菌在适宜的温度下快速生长繁殖