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更新时间:2012-01-01
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1.

T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。

(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除       ,因为后者产生的

        会抑制侧芽的生长。

(2) 为筛选出已转化的个体,需将T代播种在含        的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T代)。

(3) 为筛选出具有抗盐性状的突变体,需将T代播种在含        的培养基上,获得所需个体。

(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与      植株进行杂交,再自交       代后统计性状分离比。

(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,

从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性      

(6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。

其过程是:提取      植株的DNA,用限制酶处理后,再用       将获得

的DNA片段连接成环(如右图)以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链

DNA片断中选取    作为引物进行扩增,得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

 

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【答案】

(2)(一定浓度的)除草剂

(3)(一定浓度的)盐

(4)野生型     1

(降低

(6)突变体    DNA连接酶    B、C

 

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