7.(广东高考)
(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中,常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板,植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生____________,可根据其大小选择目的菌株,所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物,活性可用一定条件下单位时间的____________表示。
(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图:
发酵液离心K菌体去除K含酶的
发酵液K透析K透析液(Ⅰ)去除K粗提物(Ⅱ)纯化K纯酶
Ⅰ中的主要成分为____________; Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。
(3)为构建基因工程菌,可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包括多次循环,每次循环包括三步:____________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是__________________________。
(4)除植酸酶外,微生物还能应用在哪些酶的生产中?(至少写两种)
答案:(1)透明圈 植酸钠的消耗量(减少量)或磷酸(肌醇)的生成量(产量)
(2)小分子杂质 凝胶色谱法:根据蛋白质之间的分子大小、吸附性质等差异进行纯化。(或电泳法:根据蛋白质之间的电荷、分子大小等差异进行纯化)
(3)变性、复性和延伸(长) 加热(或高温处理)
(4)蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶
解析:当植酸钙被植酸酶分解以后,会在平板上出现透明圈。植酸酶活性高低可以用单位时间内底物减少量来表示。(2)透析的目的是将酶与发酵液分开。分离不同种类的蛋白质可以用凝胶色谱法,原理是根据相对分子质量大小。(3)PCR技术包括三步:变性―→复性―→延伸,变性的原理是采用加热处理。(4)微生物产生酶的种类很多。例如蛋白酶、脂肪酶等。
项目 |
苹果匀浆液/mL |
上清液/mL |
90℃水浴保温4min后的上清液/mL |
现象 |
澄清时间 |
试管1 (样品管) |
30 |
30 |
|||
试管2 (对照管) |
30 |
30 |
项目 |
苹果匀浆液/mL |
上清液/mL |
90℃水浴保温4min后的上清液/mL |
现象 |
澄清时间 |
试管1 (样品管) |
30 |
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试管2 (对照管) |
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下列说法正确的是
A.加酶洗衣粉就是将酶直接加到洗衣粉中
B.目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶;脂肪酶;淀粉酶;蔗糖酶
C.温度、酸碱度和表面活性剂都会影响酶的活性
D.普通洗衣粉只是缺少酶,不会污染环境