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使用次数:175
更新时间:2014-12-18
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1.

富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一。主要是利用不同微生物生命活动特点的不同,制定环境条件,使仅适应该条件的微生物旺盛生长,从而使其数量大大增加。如图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物——对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。请分析回答:

(1)重复培养的目的是____________________________

(2)的菌落中大部分是能降解________的微生物。设置的目的是______________________________________________________________

(3)采用单细胞挑取法,将所选菌种接种到的培养基中,在操作过程中为防止污染应注意的事项是:接种环要________灭菌,待其________后,再挑取菌落接种到试管中,并塞好棉塞,操作完成后需将接种环在火焰上灼烧,目的是______________________________

(4)如果用这种方法分离土壤中的纤维素分解菌,经常用加入了________的鉴别培养基,在该培养基上,纤维素分解菌会因为产生纤维素酶使菌落周围出现________

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题型:填空题
知识点:微生物的利用
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【答案】

 (1)重复培养的目的是扩大培养(使分解对羟基苯甲酸的微生物比例增高)(2)题图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物——对羟基苯甲酸的微生物的实验过程,所以的菌落中大部分是降解对羟基苯甲酸的微生物;为对照,所以设置的目的是对照作用。(3)采用单细胞挑取法,将所选菌种接种到的培养基中,在操作过程中为防止污染应注意的事项是:接种环要在火焰上灼烧灭菌,待其冷却后,再挑取菌落接种到试管中,并塞好棉塞,操作完成后需将接种环在火焰上灼烧,目的是杀灭残留物。(4)从土壤中分离纤维素分解菌使用选择培养基,培养基中碳源只是纤维素并加刚果红染色,会产生透明圈。通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

答案 (1)使分解对羟基苯甲酸微生物的比例增高

(2)对羟基苯甲酸 对照作用

(3)在火焰上灼烧 冷却 杀灭残留物

(4)刚果红 透明圈

=
考点梳理:
根据可圈可点权威老师分析,试题“ ”主要考查你对 土壤中微生物的分离与计数 等考点的理解。关于这些考点的“资料梳理”如下:
◎ 土壤中微生物的分离与计数的定义
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数:

1.分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据:根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
②实例:PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶,就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度.pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法:能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
2.统计菌落数目的方法
(1)稀释涂布平板法(间接)
①当样品的稀释庋足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。
(2)利用显微镜直接计数
3.分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够分解尿素。
4.实验流程
土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定

◎ 土壤中微生物的分离与计数的知识扩展
(1)培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
(2)实验室中微生物的筛选原理实验室筛选:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
(3)Taq细菌是耐高温的微生物。
(4)培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或出去某些营养物质,一直其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
(5)测定微生物数量的方法:
①直接计数法:常用显微镜直接技术法,一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
②间接计数法:常用稀释平板计数法,平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。
(6)通常用来作为菌种鉴定的重要依据的是菌落。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的知识拓展
知识拓展:

1、Taq细菌是耐高温的微生物。
2、培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或出去某些营养物质,一直其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
3、测定微生物数量的方法:
①直接计数法:常用显微镜直接技术法,一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
②间接计数法:常用稀释平板计数法,平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。4、通常用来作为菌种鉴定的重要依据的是菌落。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的教学目标
1、识记土壤中微生物的分离原理。
2、识记土壤中微生物的计数方法。
3、识记土壤中微生物的分离与计数的实验流程。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的考试要求
能力要求:了解/识记
课时要求:1
考试频率:常考
分值比重:0.5

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