研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白是一种跨膜蛋白，在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达．抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段．图1表示H蛋白的结构，胞外区具有抗原特异性，图2示抗H蛋白单克隆抗体的制作过程，图中的“+”表示含有、“﹣”表示没有，Ig表示抗体．

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中　   　（填“低表达”或“高表达”）．制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，最简便的做法是根据H蛋白　     　区结构特点构建目的基因，转入原核细胞表达并提纯．

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，从该小鼠的脾脏中分离　          　细胞与骨髓瘤细胞进行融合，使用的化学诱导剂是　                 　．

（3）将融合细胞在选择培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长．将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用　             　技术进行抗体阳性检测，从而筛选出                    　细胞．

（4）在将筛选得到的杂交瘤细胞通过体外培养获取单克隆抗体的过程中，为避免有害代谢产物的积累，常采取的措施是　                   ．

（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞．这充分体现了单克隆抗体　                　的特点．

答案

解：（1）根据题意可知，H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达，因此原癌基因的表达产物H蛋白在正常组织中低表达；由于抗体主要存在于细胞外液中，因此根据H蛋白的结构图可知，若用H蛋白制备抗原需要利用胞外区基因，由制备获得的抗体作用于该抗原的胞外区．

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，从该小鼠的脾脏中分离 浆细胞（免疫后的B细胞、B细胞）细胞与骨髓瘤细胞进行融合，使用的化学诱导剂是 PEG（聚乙二醇）．

（3）将融合细胞在选择培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长．将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用 抗原﹣抗体杂交技术进行抗体阳性检测，从而筛选出 能产生抗H蛋白抗体的杂交瘤细胞．

（4）在将筛选得到的杂交瘤细胞通过体外培养获取单克隆抗体的过程中，为避免有害代谢产物的积累，常采取的措施是 定期更换培养液．

（5）单克隆抗体的优点是特异性强，灵敏度高、化学性质单一等特点．

故答案为：

（1）低表达   胞外

（2）浆细胞（免疫后的B细胞、B细胞）   PEG（聚乙二醇）

（3）抗原﹣抗体杂交   能产生抗H蛋白抗体的杂交瘤细胞

（4）定期更换培养液

（5）特异性强（识别抗原部位专一）