转基因抗病香蕉的培育过程如图。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。
（1）构建重组质粒需要用限制酶和 酶。
（2）基因工程中除质粒外， 和 也可作为载体。基因工程操作的核心步骤是 。
（3）将重组质粒导入植物细胞常用方法是 ；若将重组质粒导入大肠杆菌细胞，需用 处理大肠杆菌。
（2）若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割？请说明理由
。要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？ 。
（1）DNA连接酶 （2）动植物病毒 λ噬菌体的衍生物
基因表达载体的构建 （3）农杆菌转化法（或基因枪法、花粉管通道法） Ca2+
（4）不能，因为用SmaⅠ酶进行切割会破坏抗病基因的结构（2分） 不能
转基因生物的安全性：
1、转基因生物存在安全性问题的原因
(1)目前对基因的结构、基因间的相互作用及基因的调控机制都了解得相当有限。
(2)目的基因往往是异种生物的基因。
(3)外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的。
2、转基因生物的安全性争论：
（1）基因生物与食物安全：
反方观点：反对“实质性等同”、出现滞后效应、出现新的过敏原、营养成分改变
正方观点：有安全性评价、科学家负责的态度、无实例无证据
（2）转基因生物与生物安全：对生物多样性的影响
反方观点：扩散到种植区之外变成野生种类、成为入侵外来物种、重组出有害的病原体、成为超级杂草、有可能造成“基因污染”
正方观点：生命力有限、存在生殖隔离、花粉传播距离有限、花粉存活时间有限
（3）转基因生物与环境安全：对生态系统稳定性的影响
反方观点：打破物种界限、二次污染、重组出有害的病原微生物、毒蛋白等可能通过食物链进入人体
正方观点：不改变生物原有的分类地位、减少农药使用、保护农田土壤环境
3、理性对待转基因技术：趋利避害，不能因噎废食。
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