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使用次数:199
更新时间:2017-05-17
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1.

【生物——选修1:生物技术实践】

某校实验小组对某种品牌的酸奶中乳酸菌的数量进行了测定。取6支灭菌的试管,分别加入9mL灭菌的生理盐水,标号为B1B2B3B4B5

B6;吸取1mL酸奶样液加入试管B1中,混合均匀;然后另取一支吸管从B1中吸取1mL溶液,加入B2中,依次类推,最后从试管B6中取0.1mL样液进行涂布计数,涂布三个平板,其菌落数分别为2.51.2.65 276个。

请回答下列问题:

1)培养乳酸菌除了必要的________________外,还需在培养基中添加维生素。

2)制备乳酸菌的培养基过程中,对培养皿灭菌的常用方法是________________;待平板冷凝后,要将平板倒置,其目的是________________________

3)该实验小组对乳酸菌接种所采用的方法是________________。根据酸奶样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的________;根据三个平板中菌落数,可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为________/mL,该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比,一般________(填“偏大”或“偏小”)。

4)为了使测量结果更加准确,该实验对照组的设置是________________

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题型:填空题
知识点:微生物的利用
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【答案】

1)营养物质

2)干热灭菌法     防止平板冷凝后,培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染

3)稀释涂布平板法    菌落数目   2.64×109   偏小

4)另增设一组培养基,接种等量灭菌的无菌水,其他操作均相同

=
考点梳理:
根据可圈可点权威老师分析,试题“ ”主要考查你对 土壤中微生物的分离与计数 等考点的理解。关于这些考点的“资料梳理”如下:
◎ 土壤中微生物的分离与计数的定义
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数:

1.分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据:根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
②实例:PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶,就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度.pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法:能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
2.统计菌落数目的方法
(1)稀释涂布平板法(间接)
①当样品的稀释庋足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。
(2)利用显微镜直接计数
3.分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够分解尿素。
4.实验流程
土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定

◎ 土壤中微生物的分离与计数的知识扩展
(1)培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
(2)实验室中微生物的筛选原理实验室筛选:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
(3)Taq细菌是耐高温的微生物。
(4)培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或出去某些营养物质,一直其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
(5)测定微生物数量的方法:
①直接计数法:常用显微镜直接技术法,一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
②间接计数法:常用稀释平板计数法,平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。
(6)通常用来作为菌种鉴定的重要依据的是菌落。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的知识拓展
知识拓展:

1、Taq细菌是耐高温的微生物。
2、培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或出去某些营养物质,一直其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
3、测定微生物数量的方法:
①直接计数法:常用显微镜直接技术法,一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
②间接计数法:常用稀释平板计数法,平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。4、通常用来作为菌种鉴定的重要依据的是菌落。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的教学目标
1、识记土壤中微生物的分离原理。
2、识记土壤中微生物的计数方法。
3、识记土壤中微生物的分离与计数的实验流程。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的考试要求
能力要求:了解/识记
课时要求:1
考试频率:常考
分值比重:0.5

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