在含有X-gal和IPTG物质的培养基上，大肠杆菌质粒上的lacZ基因如表达出产物β-半乳糖苷酶，则能使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色，基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞。某基因工程操作部分过程如下，请据图回答：
（1）限制酶EcoRI的识别序列和酶切位点是-G↓AATTC-，SmaI的识别序列和酶切位点是-CCC↓GGG-，图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是 。限制酶EcoRI在质粒上的酶切位点在lacZ基因中，故该基因工程操作中，lacZ基因的作用为 基因。
（2）获取目的基因后，常利用 技术在体外将其大量扩增，此过程需要一种特殊的酶叫 。
（3）转化过程中，大肠杆菌应先用 处理，使其成为
细胞。
（4）含有目的基因的菌落的颜色为__________，原因是 。
答案
（1）-TTAA 标记(或报告)
（2）PCR（多聚酶链式反应） Taq酶（或“Taq DNA聚合酶”“耐高温的DNA聚合酶”）
（3）Ca2+（或CaCl2溶液） 感受态
（4）白色 lacZ标记基因区插入外源基因后被破坏，不能表达出β-半乳糖苷酶，故菌落为白色
