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使用次数:117
更新时间:2017-09-14
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1.

丁酸梭菌,又名酪酸梭菌,是存在于人和禽畜肠道中的一种厌氧细菌,能抑制肠道中有害菌的生长并促进有益菌的生长,可用作禽畜饲料添加剂。某科研人员从断奶仔猪的盲肠内容物中分离培养丁酸梭菌,进行了一系列相关实验。配制丁酸梭菌增殖培养基,培养基的成分如表中所示。

(1)微生物生长繁殖所需的培养基中的主要物质有碳源、氮源、水和______________。若要制备固体培养基,除上述成分外,还需加入的成分是______________。为了保证无菌操作,调节pH后应对培养基进行处理,常采用的方法是______________。

(2)除了保证无菌操作外,培养丁酸梭菌时还需要提供______________环境,于37℃下培养36 h左右。

(3)为统计丁酸梭菌的数目,将分离得到的一个丁酸梭菌菌落置于1L无菌水中,搅拌均匀后,取0.1 mL上述液体用____________法接种在一个培养皿上,重复操作,共制成三个带菌培养皿,继续培养一段时间后,统计三个培养皿中的菌落数分别是236、227、242,则该菌落中丁酸梭菌的数目大致为_______个。

(4)用上述方法测得的丁酸梭菌的数量______________(填“大于”、“等于”或“小于”)菌落中实际丁酸梭菌的数量,可能的原因是_____________________。学%科%网...

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题型:填空题
知识点:微生物的利用
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【答案】

   (1). 无机盐    (2). 琼脂    (3). 高压蒸汽灭菌法    (4). 无氧    (5). 稀释涂布平板    (6). 2.35×l06    (7). 小于    (8). 两个或多个丁酸梭菌连在一起时形成一个菌落

=
考点梳理:
根据可圈可点权威老师分析,试题“ ”主要考查你对 土壤中微生物的分离与计数 等考点的理解。关于这些考点的“资料梳理”如下:
◎ 土壤中微生物的分离与计数的定义
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数:

1.分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据:根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
②实例:PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶,就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度.pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法:能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
2.统计菌落数目的方法
(1)稀释涂布平板法(间接)
①当样品的稀释庋足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。
(2)利用显微镜直接计数
3.分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够分解尿素。
4.实验流程
土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定

◎ 土壤中微生物的分离与计数的知识扩展
(1)培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
(2)实验室中微生物的筛选原理实验室筛选:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
(3)Taq细菌是耐高温的微生物。
(4)培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或出去某些营养物质,一直其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
(5)测定微生物数量的方法:
①直接计数法:常用显微镜直接技术法,一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
②间接计数法:常用稀释平板计数法,平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。
(6)通常用来作为菌种鉴定的重要依据的是菌落。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的知识拓展
知识拓展:

1、Taq细菌是耐高温的微生物。
2、培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或出去某些营养物质,一直其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
3、测定微生物数量的方法:
①直接计数法:常用显微镜直接技术法,一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
②间接计数法:常用稀释平板计数法,平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。4、通常用来作为菌种鉴定的重要依据的是菌落。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的教学目标
1、识记土壤中微生物的分离原理。
2、识记土壤中微生物的计数方法。
3、识记土壤中微生物的分离与计数的实验流程。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的考试要求
能力要求:了解/识记
课时要求:1
考试频率:常考
分值比重:0.5

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