酵母菌在缺氧、pH为.4.5-6.0的条件下生长繁殖，而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。某同学用果园土为实验材料，从土壤中分离纯化酵母菌。实验步骤如下：

    ①土壤取样、制备样品液；

    ②配制培养基并灭菌、制作平板若干；

      培养基A: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖琼脂培养基

      培养基B: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖培养液

    ③用无菌吸管取样品液1ml，注入到有30ml培养基B的锥形瓶中，在30℃、无氧环境中培养24h;

    ④24h后，用另一支无菌吸管从锥形瓶中取培养液0.lml，分别接种到若干培养基A的平板上，倒置于37℃的恒温箱中培养48小时；

    ⑤镜检、菌种保藏。

    请回答下列问题：

    (1)根据实验结果，判断酵母菌的呼吸方式为___        _。

    (2)第②步配制的培养基，常采用的灭菌方法是____            。

    (3)第③步实验操作是否具有选择作用，____，说明理由_______                    。

    (4)第④步的接种方法____           。

    (5)某同学欲测定样品液中酵母茁数量，采用显微镜直接计数方便快捷并且仪器损耗较小。这样得出的结果往往比实际值____（填“偏高”、“基本不变” “偏低”），理由是__                        _                                        _。

答案

（1）兼性厌氧型

（2）高压蒸汽灭菌

（3）有

无氧、乳酸的酸性条件可以抑制其它微生物的生长，而酵母菌生长繁殖

（4）稀释涂布平板（或涂布平板）

（5）偏高  计算时也包括了酵母菌死细胞（以及微小杂物）