临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题:
(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用 法或 法将样本接种于 固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。
(2)为统计样品中活菌的数目,取样品适当稀释,用涂布法接种于培养基表面,在37℃培养箱中培养适当时间后形成菌落,一般选择菌落数在 的平板进行计数
(3)为了检验该致病菌对于抗生素的敏感性,在该病菌菌落均匀生长的平板的不同位置,分别放置含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片,培养一段时间后,在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A>C>D>B,由此推断,该病人目前适合使用的抗生素是 。含C的滤纸片周围透明圈比含A的小,说明 ;若抗生素B的滤纸片周围没有出现透明圈,最可能的原因是该病人长期服用抗生素B 导致的结果;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现一个菌落,这种菌落的出现可能是由于接种过程不严格导致的 ,也可能是由于基因突变产生的抗生素D的耐药菌,这种变异的特点是 。
(4)培养基的灭菌方法是 灭菌法,接种环的灭菌方法是 灭菌法。接种过程应该在 进行。
(1)平板划线 稀释涂布平板
(2) 30----300
(3)A; 该致病菌对C的敏感性比对A的弱; 杂菌污染
DNA复制时期(4)高压蒸汽 灼烧 点燃的酒精灯旁
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