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使用次数:131
更新时间:2020-08-27
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1.

鸸鹋油提取自澳洲动物鸸鹋(一种当地常见鸟类)的背部脂肪,具有很多用途,如促进伤口愈合,缓解关节炎等,也常与一些抗菌成分混合制成抗菌药物,近年来受到研究人员的关注。

(1)随着抗菌药物被广泛使用,病原菌的抗药性基因频率发生             (填“定向”或“不定向”)改变,人们迫切希望发现新结构的抗菌化合物。

(2)前期研究发现鸸鹋油的水溶性较差,所以不能在              培养基上出现清晰的抑菌圈,故将鸸鹋油与乙醇和Tween80(一种乳化剂)混合均匀制成乳液。为确定鸸鹋油的最小抑菌浓度(MIC),研究人员进行了以下实验:

①将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌分别              LB培养基中,在37℃摇床条件下培养。摇床振荡培养的原因是          

②一段时间后将上述培养基稀释为一定浓度的菌悬液,加入不同稀释浓度的鸸鹋油乳液并振荡混匀,培养20h后测定菌体的存活状况,结果如下表。

鸸鹋油浓度/%

菌体生长情况

大肠杆菌

金黄色葡萄球菌

沙门氏菌

0

+

+

+

0.00156

+

+

+

0.00313

+

+

+

0.00625

-

+

+

0.0125

-

-

+

0.025

-

-

+

0.05

-

-

+

:+”表示有菌生长:-”表示无菌生长。

上述结果显示:          

(3)常见抗菌药物青霉素的抗菌机理是抑制细菌细胞壁的合成。有人提出鸸鹋油可增大菌体细胞膜的通透性。已知多数细菌体内存在β—半乳糖苷酶,可催化乳糖水解生成          和半乳糖,邻硝基酚一β半乳糖苷(ONPG)是一种乳糖类似物,可进入菌体,被β—半乳糖苷酶水解为邻硝基苯酚(一种黄色物质)。分光光度计可定量检测溶液中某种物质的含量。

为确定鸸鹋油能否增大菌体细胞膜通透性,请你根据上述原理写出实验思路。

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题型:综合题
知识点:微生物的利用
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【答案】

1)定向

2)固体

①接种供氧、目的菌与营养物质充分接触

②大肠杆菌对鸸鹋油较为敏感,最小抑菌浓度约为0.00625%,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度约为0.0125%,并且鸸鹋油对沙门氏菌没有表现出抑菌性

3)葡萄糖

将大肠杆菌(或其他细菌)置于培养液中培养一段时间,再加入ONPG和一定浓度(≥MIC)的鸸鹋油,对照组不加鸸鹋油。一段时间后利用分光光度计测量邻硝基苯酚的量,记录并比较。

=
考点梳理:
根据可圈可点权威老师分析,试题“ ”主要考查你对 土壤中微生物的分离与计数 等考点的理解。关于这些考点的“资料梳理”如下:
◎ 土壤中微生物的分离与计数的定义
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数:

1.分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据:根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
②实例:PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶,就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度.pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法:能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
2.统计菌落数目的方法
(1)稀释涂布平板法(间接)
①当样品的稀释庋足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。
(2)利用显微镜直接计数
3.分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够分解尿素。
4.实验流程
土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定

◎ 土壤中微生物的分离与计数的知识扩展
(1)培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
(2)实验室中微生物的筛选原理实验室筛选:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
(3)Taq细菌是耐高温的微生物。
(4)培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或出去某些营养物质,一直其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
(5)测定微生物数量的方法:
①直接计数法:常用显微镜直接技术法,一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
②间接计数法:常用稀释平板计数法,平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。
(6)通常用来作为菌种鉴定的重要依据的是菌落。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的知识拓展
知识拓展:

1、Taq细菌是耐高温的微生物。
2、培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或出去某些营养物质,一直其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
3、测定微生物数量的方法:
①直接计数法:常用显微镜直接技术法,一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
②间接计数法:常用稀释平板计数法,平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。4、通常用来作为菌种鉴定的重要依据的是菌落。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的教学目标
1、识记土壤中微生物的分离原理。
2、识记土壤中微生物的计数方法。
3、识记土壤中微生物的分离与计数的实验流程。
◎ 土壤中微生物的分离与计数的考试要求
能力要求:了解/识记
课时要求:1
考试频率:常考
分值比重:0.5

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