生长激素制剂是治疗侏儒症的特效药。利用基因工程让大肠杆菌合成人类的生长激素,部分流程如图所示(注:Ampr为氨苄青霉素抗性基因,Tetr为四环素抗性基因,Ori是复制原点;EcoRⅠ、BglⅡ、ClaⅠ表示限制酶)。回答下列问题。
(1)EcoRⅠ识别的碱基序列是GAATTC,该序列中有____________个嘌呤。切割图中的目的基因时不能选择EcoRⅠ,理由是____________。
(2)将重组质粒导入大肠杆菌时,常选用____________处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞。该状态的细胞具有____________的特性。
(3)利用标记基因筛选含重组质粒的大肠杆菌时,所用培养基中需添加____________(填“氨苄青霉素”或“四环素”),理由是____________。该基因工程所用的大肠杆菌细胞内本身不能携带____________基因,否则筛选出的大肠杆菌细胞内不一定有目的基因。
6 该酶识别的序列在目的基因中间,会破坏目的基因 Ca2+ 易从外界环境吸收DNA 氨苄青霉素 重组质粒中有氨苄青霉素抗性基因,而四环素抗性基因被破坏 氨苄青霉素抗性
【分析】
1、基因工程操作的工具是限制性内切酶、DNA连接酶和运载体;基因工程操作的步骤为提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达。目的基因的检测有多种手段,如①DNA分子杂交技术;②分子杂交技术;③抗原-抗体杂交技术。2、标记基因结构完整,则能在对应培养基中生长。
【详解】
(1EcoRⅠ识别的碱基序列应为含有6个碱基对的双链DNA片段,根据碱基互补配对原则,其中共有6个嘌呤;图中生长激素基因是目的基因,而该基因中有EcoRⅠ识别的序列,使用该酶切割会破坏目的基因,故不能选择EcoRⅠ切割目的基因。
(2)大肠杆菌细胞最常用的转化方法是:用Ca2+处理大肠杆菌细胞,改变细胞膜的通透性,使之成为感受态细胞;该状态的细胞易从外界环境吸收DNA。
(3)利用标记基因筛选含重组质粒的大肠杆菌时,四环素抗性基因被破坏,而重组质粒中有氨苄青霉素抗性基因,因此,培养基中应添加的抗生素是氨苄青霉素;故为达到筛选目的,该基因工程所用的大肠杆菌细胞内本身不能携带氨苄青霉素基因。
【点睛】
本题考查基因工程的相关知识,解答本题的关键是掌握基因工程的原理、操作工具及操作步骤,能正确分析题图,同时能结合图中信息准确答题。
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