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入库时间：2020-11-04生物工程是一门生物科学与工程技术有机结合而兴起的一门综合性的科学技术,近些年来发展迅猛,硕果累累。下列关于生物工程的说法,不正确的是( )
A.植物体细胞杂交和动物细胞融合技术的原理是一样的,植物组织培养和动物细胞培养技术的原理是不同的
B.从理论上讲,基因工程和细胞工程都可以定向改造生物的遗传性状和克服远缘杂交不亲和的障碍
C.基因工程的工具酶有限制酶、DNA 连接酶等,细胞工程的工具酶有纤维素酶、胰蛋白酶等
D.通过基因工程和发酵工程可以生产出乙肝疫苗、胰岛素、某些种类的单克隆抗体
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入库时间：2020-09-15基因编辑婴儿是指通过基因编辑技术修改人体胚胎、精子或卵细胞细胞核中的DNA后生下的婴儿。请回答相关问题：
(1)病毒对入侵的宿主细胞或培养细胞有高度的特异性。HIV主要攻击________细胞，其原因是_______________________________________________________
_________________________________________________________________
______________________________________________________________。
(2)基因编辑婴儿比起常规试管婴儿多一个步骤，即在受精卵时期，把Cas9蛋白和特定的引导序列(向导RNA)注射到受精卵中，向导RNA通过________________原则对目的基因进行精确定位；Cas9蛋白会使目的基因上下游的DNA双链断裂，其相当于基因工程中的________酶，切割的化学键为________________。
(3)试管婴儿培育过程中，涉及早期胚胎培养和胚胎移植等技术，哺乳动物胚胎的培养液的成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加______________________________________________________________
(至少答出两点)等营养成分，以及血清等物质，其中添加血清的作用是______________________________________________________________；
胚胎移植实质上是早期胚胎在________________________________的转移。
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入库时间：2020-09-11利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解，请据图回答：
（1）图中①所示的生物工程技术是______；图中②所示的生物工程技术是______。
（2）在图中④所示的生物工程技术中，健康胰岛B细胞基因在导入③之前要构建______，这个步骤是基因工程的核心，构建出的分子除含目的基因外，还必须含有______。
（3）重组细胞B在一定的______如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等的作用下，可以定向分化形成胰岛B细胞。培养重组细胞B的培养液中除加入各种营养物质外，还必须加入______等一些天然成分，放在含O2和CO2的环境中培养，其中CO2的作用是______。
（4）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是______。
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入库时间：2020-09-10生物工程
研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂——内皮抑素，它能有效地抑制血管增生，他们利用基因工程技术，将内皮抑素基因转移到了酵母菌中使之表达并分泌，图示 EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三种限制酶在质粒和含内皮抑素基因的外源 DNA 片段上的切割位点，回答下列问题：
1.根据上述信息，该基因工程技术的目的基因 ，为与质粒 DNA重组，目的基因和质粒 DNA 均应用限制酶 切割。
2.下列关于质粒运载体的说法错误的是( )(多选)
A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的 DNA 改造的
D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的 DNA 中才能表达 F．没有限制酶就无法使用质粒运载体
3.若内皮抑素是一种酶，制备的合理工艺步骤应为 (选择正确的序号并排序)。
①过滤 ②沉淀 ③破碎 ④干燥 ⑤提纯
4.固定化酶是从 20 世纪 60 年代迅速发展起来的一种技术。东北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。图显示的是部分研究结果(注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量)。
从甲图所示结果可以得出的结论是 , 乙图曲线表明浓度为 的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低原因可能是 。
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入库时间：2020-09-092019 年末，一场突如其来的新冠肺炎疫情打乱了人们正常的生活节奏。2020年 1月 6 日，中国疾控中心分离出第一株新冠病毒；1 月 7 日完成对该病毒的全部基因组测序；1 月 24 日首个针对新冠病毒的核酸检测试剂盒通过审核，为新冠肺炎的诊断提供了有力的保障。新冠病毒是一种单股正链 RNA 病毒，外面包裹着衣壳蛋白和囊膜，囊膜上存在刺突蛋白，能特异性识别细胞膜上的 ACE2 受体从而感染细胞。新冠病毒进入细胞后，首先以正链 RNA 为模板翻译出 RNA 聚合酶，然后在该酶的作用下合成负链 RNA，再以负链 RNA 为模板合成大量的正链 RNA 或结构蛋白 mRNA。
（1）核酸检测多数采用实时荧光 RT—PCR 法。由于新冠病毒的遗传物质为 RNA，在进行 PCR 之前，应该将样本中的病毒 RNA 提取出来，在 酶的作用下合成互补的DNA 单链（该过程称为 RT）。PCR 过程需要加入引物，原因是 。2020 年 1 月 24 日，中国疾控中心公布了针对新冠病毒核酸不同序列设计的引物，其中针对衣壳蛋白基因的一段引物Ⅰ为 GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT，能否依据此序列设计出另一段引物Ⅱ 的序列？ ，理由是 。与传统 PCR 相比，荧光 RT—PCR 过程中加入了荧光探针，可通过荧光信号对 PCR 进程实时检测，PCR 产物越多，荧光越强。如果待测样本中没有检测出荧光，初步断定样本中 （填“含有”或“不含有”）新冠病毒。
（2）由于核酸检测比较费时费力，现已开发出多款针对新冠病毒的抗原或抗体检测试剂盒，可在更短时间内得出检测结果。假如你是一名科研人员，现提供新冠病毒刺突蛋白基因、能产生专一针对新冠病毒抗体的 B 细胞及其它相关的生物学材料，请运用现代生物技术，设计一款能够快速大规模生产、针对新冠病毒抗原或抗体检测的试剂盒，简要写出生产试剂盒的设计思路（只写出针对抗原或抗体检测的一种方案即可）。
（3）在对新冠病毒检测的过程中，偶尔会出现核酸检测阳性而抗体检测阴性的现象，假如这两种试剂盒的质量及检测方法都没有问题，试从免疫角度分析造成这种现象可能的原因 。
（4）2020 年 2 月 15 日，法维拉韦正式获得国家药监局批准上市，成为我国第一个针对新冠肺炎具有潜在疗效的药物，该药物能够专一抑制新冠病毒 RNA 聚合酶，由于人体细胞内也存在 RNA 聚合酶， 有人担心该药物的安全性， 请分析他的担心有无道理？ ，理由是 。
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入库时间：2020-09-04编码蛋白质甲的DNA序列（序列甲）由A、B、C、D、E五个片段组成，编码蛋白质乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示。
（1）现要通过基因工程的方法获得蛋白乙，若在启动子的下游直接接上编码蛋白质乙的DNA序列（TTCGCTTCT······CAGGAAGGA），则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译
出蛋白乙，原因是 。
（2）某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中，在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等，还加入了序列甲作为 ，加入了 作为合成DNA的原料。
（3）现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2.
①由图2可知：当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增加，可采用的方法是 ，细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO2 浓度，CO2 的作用是 。
②仅根据图1、图2可知，上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少 （填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。
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入库时间：2020-08-28抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白，临床上主要用于血液性疾病的治疗。凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。下列是生产这两种酶的相关思路，请回答下列问题：
(1)图1为通过培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程。
①图中过程a指的是利用 法将目的基因导入受精卵，受体细胞不选用体细胞的理由是 。
②在胚胎移植前，需进行 ，目的是确定要培育的个体能产奶。
③可采用 法来鉴定牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白。
(2)从牛胃液中分离得到的凝乳酶以其催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。
①从牛胃细胞中提取mRNA，再通过________形成cDNA。以此cDNA为模板通过PCR扩增目的基因，有时需要在引物的5′端设计________(填“限制酶”、“DNA连接酶”或“RNA聚合酶”)识别序列，以便构建重组DNA分子。
②为提高重组DNA分子的比例，在构建重组DNA分子(如图2所示)时最好选用______________作限制酶。
③经研究发现，如果将该凝乳酶的第20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，则其催化能力将提高2倍。现已知通过蛋白质工程可生产高效凝乳酶，请写出有关制备步骤：
___________________________________________________________________________________________________________________________________________。
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入库时间：2020-08-20下列关于生物工程的叙述，错误的是（ ）
A．可利用植物组织培养技术实现紫草素的工厂化生产
B．由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生基因突变
C．动物细胞融合与植物体细胞杂交所依据的原理相同，都能形成杂种个体
D．试管动物技术可以充分发挥优良动物的繁殖潜力
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入库时间：2020-08-19人体移植器官短缺是一个世界性难题。目前，科学家正试图利用基因工程方法对猪的器官进行改造，再结合克隆技术，培养出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。如图为科学家借助CPISPR﹣Cas9基因编辑技术剔除猪抗原决定基因的示意图（不同的sgRNA可以识别不同的DNA序列），请回答下列问题：
（1）DNA重组技术主要用到的工具酶包括DNA连接酶和 。图中充当该酶的物质是 。
（2）Cas9﹣sgRNA复合体能够精准识别某核苷酸序列的原因可能是 。
（3）培育转基因猪时，应使用 技术将剔除了猪抗原决定基因的基因表达载体导入猪成纤维细胞中，再将该细胞的细胞核注入 期的去核卵母细胞中，构建重组胚胎。
（4）胚胎培养液中除了一些无机盐和有机盐外，还需要添加“两素”（维生素、激素）、“两酸”等营养成分，以及血清等物质，其中“两酸”是指 。
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入库时间：2020-08-18下列经生物技术操作获得的性状，可以遗传给后代的是
A．将药用蛋白基因表达载体转入大肠杆菌，筛选获得能产生药用蛋白的大肠杆菌
B．将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，使患者免疫能力恢复
C．经EMS处理后获得抗花叶病毒特性的愈伤组织，经组织培养获得抗病植株
D．将荷斯坦牛细胞核注入去核卵母细胞中，激活发育为高产奶牛
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入库时间：2020-08-17人溶菌酶（hLTF）是人乳汁中重要的抗菌蛋白。某团队将hLTF基因连接到质粒载体中构建了hLTF基因表达载体，通过构建转基因羊乳腺生物反应器生产抗菌蛋白。请回答：
(1)为实现hLTF基因的大量扩增，可利用图中的引物____组合进行PCR。为保证hLTF基因和表达载体的充分连接，PCR扩增时，应在基因上、下游引物的端分别添加相应的酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制酶酶切位点，主要目的是___________。
(2)Cre/loxp位点特异性重组系统可实现转基因受体细胞染色体(DNA)上基因的定点整合和重组。重组酶Cre能识别特异的DNA序列，即loxP位点，使loxP位点间的基因序列被删除或重组，Cre/loxp介导三种不同的重组反应。
①loxP位点是一段DNA序列，包括两个反向重复序列和一个不对称的间隔区组成反向重复序列是Cre重组酶的特异识别位点，而间隔区域决定了loxP位点的方向。Cre酶能特异性地识别反向重复序列并在特定位置切开磷酸二酯键，其功能类似于基因工程中的_________酶。
②如果三种重组反应均发生在染色体上，可能会导致染色体上基因的_________，重组反应的结果取决于_____________。
(3)构建乳腺生物反应器的方法有多种，一是通过转基因技术将重组基因导入到受精卵中，使其生长发育成转基因动物：二是通过转基因体细胞核移植技术生产克隆动物作为生物反应器。两种方法获得的胚胎都要借助_____技术和_____技术才能获得转基因动物个体。
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入库时间：2020-08-08(2019·山东日照高三模拟)目前现代生物技术迅速发展，已被广泛应用于医疗卫生领域，如生物制药、器官移植、基因治疗等。请回答下列问题：
(1)研究发现，人体缺乏α抗胰蛋白酶易患肺气肿，科研人员将α抗胰蛋白酶基因与____________________等调控组件重组构建基因表达载体，然后通过__________技术，导入羊的受精卵中，成功培育出了转基因羊，其乳汁中含有人类的α抗胰蛋白酶，可用于治疗肺气肿。
(2)机体对移植的异体细胞、组织或器官会产生免疫排斥反应，通过对患者的ES细胞进行______________，培育出人造组织、器官，进而解决免疫排斥问题。ES细胞主要来源于早期胚胎的____________细胞或原始性腺。
(3)P53基因是人体内的一种抑癌基因，将P53基因与腺病毒拼装而成的重组病毒导入人体可用于治疗肿瘤。拼装该重组病毒所需的工具酶有____________________。用上述重组病毒治疗肿瘤，二次治疗时，该重组病毒常常无法或很少能进入靶细胞，从而影响治疗效果，原因是______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
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入库时间：2020-07-30下列与实验相关的叙述不正确的是
A．培养小鼠胚胎细胞时，原代培养和传代培养均可山现接触抑制
B．调查土壤中小动物类群丰度和种群密度时，宜用标志重捕法
C．制备单克隆抗体时，需诱导经免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合
D．植物组织培养时，在接种前对外植体进行消毒处理可减少污染
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入库时间：2017-06-25模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述，模型构建是生物学学习的一种重要方法。对下列两个生物概念模型的理解或者分析错误的有几项（ ）
①若图1表示基因工程的操作流程图，则C表示重组质粒，D是受体细胞
②若图1表示植物体细胞杂交过程，则A、B在融合前必须经过特殊处理——制备原生质体，形成的C称为杂种细胞，从C到D需要的技术是植物组织培养
③若图2中B是核移植技术，C是胚胎移植技术，则形成d的过程体现了高度分化的动物体细胞也具有全能性
④若图2中B表示下丘脑，C表示垂体，切断下丘脑与垂体的联系，不会对甲状腺造成影响
A. 一项 B. 两项 C. 三项 D. 四项
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入库时间：2017-03-18基因疫苗是指将编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体免疫应答。某科研所计划采用基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫性的高产奶牛。请回答下列问题：
（1）基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括启动子、 、 、 。
（2）制备基因疫苗的基因可以从基因文库中获取，基因文库实际上是含有某种生物不同基因的许多DNA片段的 群体。
（3）检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上的检测方法是 。
（4）胚胎工程最后一道工序的实质是 。
（5）为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用椹胚或 胚进行分割。
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入库时间：2016-10-20基因工程实现了 改造生物性状；基因工程的核心步骤是 ；进行PCR时，加入反应体系的 决定了目的DNA被扩增的片段．
（2）在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中，运用的技术手段是 ，依据的原理是 ；已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄﹣马铃薯”属于 倍体．
（3）治疗性克隆是指把患者体细胞核移植到去核卵母细胞中构建形成重组细胞，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗．治疗性克隆采用的技术有体细胞 、早期胚胎培养技术和干细胞培养；
ES细胞可从重组细胞培养到囊胚时期的 中分离；在培养液中加入 可诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞．
（4）生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点．下列叙述，错误的是
A．应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质
B．当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆
C．反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿
D．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
（5）习近平在纳扎尔巴耶夫大学回答学生问题时指出：“我们既要绿水青山，也要金山银山．宁要绿水青山，不要金山银山，而且绿水青山就是金山银山．”请说出这段话包含哪些生态工程原理： ．．胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞．另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造．
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入库时间：2016-10-15模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述，模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法．对下列两个生物概念模型的理解或者分析错误的组合是（ ）
①若图1表示基因工程的操作流程图，则C表示重组质粒，D是受体细胞
②若图1表示植物体细胞杂交过程，则A、B在融合前必须经过特殊处理﹣﹣制备原生质体，形成的C称为杂种细胞，从C到D需要的技术是植物组织培养
③若图2中B是核移植技术，C是胚胎移植技术，则形成d的过程体现了高度分化的动物体细胞也具有全能性
④若图2中B表示下丘脑，C表示垂体，切断下丘脑与垂体的联系，对胰岛的影响比对甲状腺的影响更大．
A．①② B．③④ C．①③ D．②④
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入库时间：2016-10-15进行生物工程设计时，下表各组所选择的实验材料与实验目的配置错误的是（ ）
组别 实验目的 实验材料 材料特点
1 动物细胞核移植 卵（母）细胞 细胞大，细胞质能有效调控核发育
2 体细胞诱变育种 愈伤组织细胞 分裂能力强，易诱发突变
3 植物体细胞杂交培育新品种 花粉粒 易于获取，易于培养
4 烧伤患者皮肤细胞移植 自体皮肤生发层细胞 分裂能力强，且不会引起免疫排斥
A．1 B．2 C．3 D．4
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入库时间：2016-10-09下列现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是（ ）
A．对植物的茎尖进行组织培养获得脱毒苗
B．将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，制备单克隆抗体
C．利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜-甘蓝”
D．将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株
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入库时间：2016-04-15回答下列有关现代生物科技的问题：
(1)糖尿病在现代社会中的发病率越来越高，主要是由于患者胰岛B细胞受损，胰岛素分泌不足引起的。对此，某同学根据所学知识提出了用转基因动物生产胰岛素的治疗方法。
基本程序：①获取目的基因→②基因表达载体的构建→③将目的基因导入受体细胞→④目的基因的检测与鉴定。其中①和②的操作中需要用的相同的工具酶作用于______________键。利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在________酶的作用下延伸形成DNA。
(2)植物细胞工程中，科学家采用体细胞杂交方法终于获得“番茄—马铃薯”超级杂种植株，该过程中可诱导原生质体融合的物理方法有___________、__________和电激等，获得的杂种细胞还需经________________技术培养成杂种植株。
(3)动物细胞培养中，通常需要用_________________________处理动物组织块，使之分散成单个细胞；克隆动物的获得是利用了______________的全能性。