我国珠江三角洲地区，为充分利用土地，创造了一种挖深鱼塘、垫高基田、塘基植桑、塘内养鱼的高效人工生态系统﹣﹣桑基鱼塘，如图所示．据图回答有关问题：

（1）生态工程遵循的基本原理有          、          、         、整体性原理和系统学与工程学原理等．

（2）该生态工程能将蚕沙、蔗叶、滤泥等变成鱼类的饵料，塘泥中的微生物能将有机物转化成无机物，为甘蔗、桑树的光合作用提供无机营养，这一过程实现了          ．

（3）蚕沙是蚕食桑叶后排泄出来的粪便，蚕沙富含粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等营养物质，是上等的肥料，也是猪、鱼、羊的理想饲料．某种鱼专以蚕沙为食，假设某一时间段蚕从上一个营养级固定的能量为1.5×10⁵ kJ，那么这部分能量最多有    kJ被这种鱼所同化．

（4）该生态系统向外输出的物质主要有                    ．

（5）该生态系统与一般的自然生态系统相比较，           稳定性较低，所以需要人们不断输入物质与能量．

（6）桑基鱼塘的生产方式与改造前的传统耕作方式比较，主要的优点有                 （至少答2点）．

以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a﹣﹣h为操作过程，请据图回答有关问题：

（1）“试管牛”技术的操作流程是             （填字母）．

（2）图中数字标号代表的结构名称是①       ；③           ．

（3）d操作的名称是              ．

（4）图中用到的激素是           ，过程h常用的方法是             ．

（5）受体母牛必须和供体牛属于          ．移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是                            ．

将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．

请据图回答：

（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在        的催化下，合成互补的单链DNA，然后在              作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的        序列，推测出响应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的             序列，再通过化学方法合成所需基因．

（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有    、          4种脱氧核糖核苷三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．

（3）由A和载体B拼接形成的C通常称为                 ．

（4）在基因工程中，常用Ca²⁺处理D，其目的是                         ．

如图甲表示某细菌的质粒中相关限制酶的切割位点，图乙表示目的基因所在的DNA中相关限制酶的切割位点．请分析并回答下列问题：

（1）用SmaⅠ限制酶处理图甲所示的质粒会得到   个DNA片段，用AluⅠ处理图乙所示的外源DNA会增加2个游离的磷酸基团．

（2）为了避免目的基因和质粒在酶切后产生的片段发生自身环化或任意连接，以及便于筛选需要，在实际操作中，一般应选用          （填限制酶名称）同时酶切质粒和含目的基因的外源DNA．再用DNA连接酶处理．如果是用PCR技术扩增目的基因，设计引物是关键，但在扩增时退火温度一般为55～60℃，对于（A+T）%＞50%，一般用55℃；（A+T）%≤50%时一般用60℃，原因是                    ．

（3）为了筛选获得含有重组质粒的大肠杆菌，实验人员首先将经转化处理过的大肠杆菌接种在含         （抗生素）的培养基中，然后用影印法将该培养基上的菌落按原来的方向印在含        （抗生素）培养基上，以筛选获得含重组质粒的细菌．在含四环素培养基中能生长繁殖，而在含氯霉素培养基中不能生长繁殖的是导入了         的大肠杆菌．

（4）经检测：在上述导入了重组质粒的大肠杆菌菌株中，目的基因正常转录形成了mRNA，但其所控制合成的蛋白质却并不具有生物活性，最可能的原因是                   ．

为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养．请回答下列问题：

（1）外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为             ．

（2）在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图所示．细胞干重在12d后下降的原因有                     ．

（3）多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体．二倍体愈伤组织细胞经    处理，会产生染色体加倍的细胞．为检测愈伤组织细胞染色体数目，压片前常采用纤维素酶和      酶解离愈伤组织．若愈伤组织细胞（2n）经诱导处理后，观察到染色体数为8n的细胞，合理的解释是               ．