下图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素
抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有_____________和_______________,构建重组质粒时需要的工具酶有_______________,对获取的目的基因可用_______________技术对其扩增。 (2)实验小组用BamH I和Blg II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了____________________。若大肠杆菌菌落显白色,说明导入了_____________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌________________(填“能”或“不能”)在该培养基上生存。
(3)将若干个质粒和目的基因用BamH I和Blg II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的产物,获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段,则目的基因的长度为____________kb(已知目的基因的长度大于1kb,1kb=1000个碱基对)。
(1)X—gal(2分)氨苄青霉素(2分) 限制酶、DNA连接酶(2分) PCR (多聚酶链式反应)(1分)
(2)没有目的基因的空质粒(2分) 重组质粒(2分) 不能(2分)
(3)1.8(2 分)
转基因生物的安全性:
1、转基因生物存在安全性问题的原因
(1)目前对基因的结构、基因间的相互作用及基因的调控机制都了解得相当有限。
(2)目的基因往往是异种生物的基因。
(3)外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的。
2、转基因生物的安全性争论:
(1)基因生物与食物安全:
反方观点:反对“实质性等同”、出现滞后效应、出现新的过敏原、营养成分改变
正方观点:有安全性评价、科学家负责的态度、无实例无证据
(2)转基因生物与生物安全:对生物多样性的影响
反方观点:扩散到种植区之外变成野生种类、成为入侵外来物种、重组出有害的病原体、成为超级杂草、有可能造成“基因污染”
正方观点:生命力有限、存在生殖隔离、花粉传播距离有限、花粉存活时间有限
(3)转基因生物与环境安全:对生态系统稳定性的影响
反方观点:打破物种界限、二次污染、重组出有害的病原微生物、毒蛋白等可能通过食物链进入人体
正方观点:不改变生物原有的分类地位、减少农药使用、保护农田土壤环境
3、理性对待转基因技术:趋利避害,不能因噎废食。
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