气孔是由两个保卫细胞围成的空腔,主要分布在植物叶片表皮。脱落酸( ABA )可通过特定的信号转导途径调节气孔的开放程度,机制如下图。已知细胞质基质中 Ca 2+ 的浓度在 20 〜 200mnol/L 之间,液泡中及细胞外 Ca 2+ 的浓度通常高达 lmmol/L 。(注:每个保卫细胞同时存在 “ROS” 途径和 “IP 3 , cADPR” 途径)
( 1 )由图可知, ABA 与 ABA 受体结合后,可通过 ROS 、 IP 3 等信号途径激活 __________ 上的 Ca 2+ 通道,使 Ca 2+ 以 __________ 方式转运到细胞质基质中。细胞质基质中 Ca 2+ 浓度的增加,促进了 K + 及 Cl - 流出细胞,使保卫细胞的渗透压降低,保卫细胞 __________ (填 “ 吸水 ” 或 “ 失水 ” ),气孔关闭。
( 2 )有人推测, ABA 受体有胞内受体和细胞膜上受体两种,为探究 ABA 受体位置,研究者进行了下列实验,请完善实验方案。
| 实验一 | 实验二 |
步骤一 | 培养叶片下表皮组织 | 培养叶片下表皮组织 |
步骤二 | 向培养液中添加同位素标记的 ABA | 向保卫细胞内直接注射足以引起 气孔关闭的一定浓度 ABA |
步骤三 | 检测 | 检测气孔开放程度 |
实验结果 | 细胞膜表面放射性明显强于细胞内,气孔关闭 | 气孔不关闭 |
( 3 )据实验一、二推测 ABA 受体只位于细胞膜上,但有人认为直接注入细胞的 ABA 可能被降解,导致气孔不关闭。因此设计了两种防降解的 “ 笼化 ABA” ,光解性 “ 笼化 ABA” 能在紫外光作用下释放有活性的 ABA ,非光解性 “ 笼化 ABA” 则不能。
实验三 | Ⅰ 组 | Ⅱ 组 |
步骤一 | 培养叶片下表皮组织 | |
步骤二 | 将 i ________ 显微注射入保卫细胞内 | 将 ii ________ 显微注射入保卫细胞内 |
步骤三 | 用 iii ________ 照射保卫细胞 30s | |
步骤四 | 检测气孔开放程度 | |
实验结果 | 气孔关闭 | 气孔不关闭 |
综合实验一、二、三结果表明, ABA 受体位于 ________________________ 。
( 4 )植物在应答 ABA 反应时能产生一类磷脂一 S1P (如图所示)。为检验 “S1P 通过 G 蛋白起作用 ” 的假设,用 ABA 处理拟南芥 G 蛋白缺失突变体保卫细胞,检测气孔开放程度的变化。请评价该实验方案并加以完善和修订 ________________________ 。
细胞膜和液泡膜 协助扩散(易化扩散) 失水 放射性的强度位置及气孔是否关闭(开放程度) 光解性 “ 笼化 ABA” 非光解性 “ 笼化 ABA” 紫外线 细胞膜上和细胞内 该实验存在两处缺陷。第一,不应该用 ABA ,应该用 S1P 处理拟南芥保卫细胞。第二,补充一组对正常拟南芥同样(用 S1P 处理)处理的对照实验
【分析】
据图分析,图中存在保卫细胞同时存在 “ROS” 途径和 “IP3 , cADPR” 两个途径,前者 ABA 与细胞膜上的受体结合,引起细胞外液和液泡中的钙离子通过离子通道进入细胞质基质,同时细胞外液和液泡中的钾离子也通过离子通道进入细胞质基质,细胞质基质中的钾离子、氯离子进入细胞质基质后再通过离子通道运出细胞外,由于以上离子的运输都没有消耗能量,且需要通过离子通道,属于协助扩散;后者 ABA 与细胞膜上的受体结合,通过两个途径引起 cADPR , IP3 刺激钙离子从液泡进入细胞质基质,进而引起质子氢通过质子泵运出细胞,且需要消耗能量,属于主动运输。
【详解】
( 1 )根据以上分析可知, ABA 与 ABA 受体结合后,可通过 ROS 、 IP3 等信号途径激活细胞膜和液泡膜上的 Ca 2+ 通道,使 Ca 2+ 以协助扩散方式转运到细胞质基质中。细胞质基质中 Ca 2+ 浓度的增加,促进了 K + 及 Cl - 流出细胞,使保卫细胞的渗透压降低,则根据渗透作用原理可知保卫细胞将失水导致气孔关闭。
( 2 )根据实验的单一变量原则判断,实验一的培养液中 ABA 进行了同位素标记,而实验二的 ABA 注射到了保卫细胞内,因此实验一的步骤三应该检测放射性的强度位置及气孔是否关闭(开放程度)。
( 3 )根据题意分析,实验的自变量是两种 “ 笼化 ABA” ,一种可以在紫外线的照射下分解,二另一种不能,因此实验中的三个空格因此是光解性 “ 笼化 ABA” 、 非光解性 “ 笼化 ABA” 、 紫外线;综合实验一、二、三结果表明, ABA 受体位于细胞膜上和细胞内。
( 4 )根据题意分析,该实验存在两处缺陷:第一,不应该用 ABA ,应该用 S1P 处理拟南芥保卫细胞;第二,补充一组对正常拟南芥同样(用 S1P 处理)处理的对照实验。
【点睛】
解答本题的关键是是对于题图的分析,弄清楚图中保卫细胞同时存在 “ROS” 途径和 “IP3 , cADPR” 两个途径的具体过程和相关原理。
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撕取蚕豆的叶表皮,剪成大小相等的小块,分别浸入不同浓度的硝酸钾溶液中。经过一段时间后,用显微镜观察实验的结果如下表,下列分析正确的有( )
KNO3溶液浓度/ (mol·L-1) | A | B | C | D | E | F |
0.11 | 0.12 | 0.125 | 0.13 | 0.14 | 0.5 | |
质壁分离程度 | — | — | 初始分离 | 分离 | 显著分离 | 显著分离 |
质壁分离复原状态 | — | — | 自动复原 | 自动复原 | 诱发复原 | 不能复原 |
A.蚕豆叶表皮细胞的细胞液浓度约为0.125~0.13 mol·L-1之间
B. 细胞质壁分离的基本条件是KNO3溶液浓度大于蚕豆表皮细胞的细胞液浓度
C.发生自动复原的原因是K+、N通过主动运输方式逐步进入细胞
D. F组不能再诱发其复原的原因是细胞因过度失水而死亡