抗虫和耐除草剂玉米双抗 12-5 是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据,采用 PC 方法进行目的基因监测,反应程序如图所示。下列叙述正确的是( )
A .预变性过程可促进模板 DNA 边解旋边复制
B .后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分
C .延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制
D .转基因品种经检测含有目的基因后即可上市
B
【分析】 PCR 过程为: ① 变性,当温度上升到 90℃ 以上时,氢键断裂,双链 DNA 解旋为单链; ② 复性,当温度降低到 50℃ 左右是,两种引物通过碱基互补配对与两条单链 DNA 结合; ③ 延伸,温度上升到 72℃ 左右,溶液中的四种脱氧核苷酸,在 DNA 聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的 DNA 链。
【详解】 A 、预变性是使引物完全变性解开, A 错误;
B 、后延伸过程后延伸是为了让引物延伸完全并让单链产物完全退火形成双链结构,可使目的基因的扩增更加充分, B 正确;
C 、延伸过程需引物参与, C 错误;
D 、转基因品种不只需要检测是否含有目的基因,还要检测是否表达,还有安全性问题, D 错误;
故选 B 。
过程 | 说明 | 图解 |
变性 | 当温度上升到90℃以上时,双链DNA解聚为单链 | ![]() |
复性 | 温度下降到50℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合 | ![]() |
延伸 | 72℃左右时,TaqDNA聚合酶有最大活性,可使DNA新链由5'端向3'端延伸 | ![]() |
细胞内DNA复制 | 体外DNA扩增(PCR) | ||
不同点 | 解旋 | 在解旋酶作用下边解旋边复制 | 80~100℃高温解旋,双链完全分开 |
酶 | DNA解旋酶、DNA聚合酶 | TaqDNA聚合酶 | |
引物 | RNA | DNA、RNA | |
温度 | 体内温和条件 | 高温 | |
相同点 | ①需提供DNA模板 ②四种脱氧核苷酸为原料 ③子链延伸的方向都是从5'端到3'端 |
项目 | 说明 | |
原理 | DNA在260nm的紫外线波段有一强烈吸收峰,峰值大小与DNA的含量是正相关 | |
过程 | 稀释 | 2μLPCR反应液,加入98μL蒸馏水,即将样品进行50倍稀释 |
对照调零 | 以蒸馏水作为空白对照,在波长260nm处,将紫外分光光度计的赌注调节至零 | |
测量 | 取DNA稀释液100μL至比色杯中,测定260nm处的光吸收值 | |
计算 | DNA含量(μg/mL)=50×(260nm的读数)×稀释倍数 |
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